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了解花卉的繁殖類別(三)
用組織培養的方法進行繁殖是一項先進技朮，可用極少量的繁殖材料，繁殖大量的植株，并可得到去病毒的壯苗，這在某些花卉的商品生產中已成為極有效的繁殖手段。 組織培養早在20世紀初即已開始，已有80多年的歷史。近年發展很快，并廣泛用于花卉登殖，現在由瓊脂培養轉向液體培養，即用發酵罐深層培養，形成微繁殖工業。目前又在研究人造種子，把用微繁殖技朮形成的不定胚和芽條用球形膠囊包裹起來，形成人造種子。這種人造種子能在適宜條件下，生長發育成植物體。但這項技朮還有很多問題需要進行研究。 1．培養基和培養條件 （1）培養基成分 培養基的成分主要包括無機鹽類（分大量元素和微量元素）、有機物質（即維生素等）、車長調節物質以及碳源等四大類：
① （2）培養基的種類 培養基的種類很多，采用哪一種培養基，對于培養是否成功有很大的關系，在1950∼19艦年初常采用White培養基，但后來有很多新的培養基，其中Ms是Murashige和skoog1962﹔ ER是Erikssonl965﹔ B5是Gambor等1968﹔ SH是shenk和Hildebrandt l972﹔ HE是Heller1953提出來的，見表1表2。 這些培養基中MS培養基應用最廣泛。ER培養基與MS培養基相似。B5培養基在愈傷組織和懸浮培養方面做了不少試驗，對有些植物很適合，SH培養基與B5相似。HE培養基為歐洲許多實驗室所用，但礦物鹽濃度稍低，應用范圍不太廣。在花卉組織培養中用MS培養基最多。 （3）引培養條件 培養條件，按培養對象的種類不同而有所不同，溫度條件一般在23∼26℃左右的恆溫條件下。光照條件對器官形成有作用，一般范圍是1000∼3000勒克司，每日12∼16小時，高于3000勒克司有強烈抑制作用。培養室要求清潔衛生，減少污染。 2.花卉組織培養的途徑 在花卉組織培養實踐中，用植物的組織或細胞培養成植株，也就是試管培養，可以通過三條途徑。 （1）通過器官發生 通過由培養的組織，產生芽及根，器官發生由于培養材料的不同又可分為兩方面：一是培養花卉植物的莖尖產生大量芽，再將芽分離轉移培養成植株﹔二是培養花卉植物器官外植體產生不定芽，發育成植株。 （2）通過煎傷組織分化成株 將花卉植物體的一小片組織培養成愈傷組織，再誘導分化成芽和根，成為完整植株。 （3）通過胚狀體發主 由培養的植株產生愈傷組織，再通過懸浮培養，或直接產生大量的胚狀體，再發育成完整植株。 3．花卉組織牆養的操作方法 花卉組織培養的操作可分為培養基配制、消毒滅菌、接種、培養等几方面。 （1）培養墓配制 選定培養基以后，需把大量元素、微量元素、有機物都配成母液，擴大倍數為稀釋液，貯存備用。使用時，根據所需配制的量，在稀釋液中加一些肌醇、水解酪蛋白、蔗糖等，再加鐵鹽（需用乙二胺四乙酸二鈉（Na2一EDTA）加硫酸亞鐵配制成螫合鐵）成營養液，然后吸取需用量，加入培養基中，再測其酸鹼度（一般pH值在5．5∼6．5之間即可），最后加瓊脂煮沸后分裝入三角瓶或試管中，封口待用。 （2）消毒滅菌 消毒滅菌非常重要，關系到組織培養的成敗。污染的途徑是器皿、用具、材料的帶菌，以及接種室的空氣、牆壁、地板等的不清潔，故必須針對所提及的几方面，進行嚴密的消毒滅菌。 ① 培養基消毒：將配制分裝好培養基的三角瓶或其他容器放入高壓滅菌鍋中，在15磅／英寸2的壓力下，經20分鐘高壓滅菌即可。 ② 器皿與用具的消毒：接種用具及玻璃器皿、洗滌材料用的無菌水，用牛皮紙包好后和培養基一起放在高壓滅菌鍋中消毒滅菌。 ③接種室消毒：接種室的地面及牆壁，在接種前后均要用1 ：50的新潔爾敏濕性消毒，每次接種前還要用紫外線燈照射消毒30∼60分鐘，并用70%的酒精，在室內噴霧，以淨化空氣，最后是超淨台台面消毒，可用新潔爾敏擦襪及70%酒精消毒。 ④ 材料處理及消毒：花卉組織培養取嫩莖、花托、葉柄、葉片均可，取得材料后，需先清理，去掉多余部分，然后沖洗、洗滌劑洗滌、漂清后放入接種室或超淨台上，用70％的酒精浸泡半分鐘，進行表面消毒，再在10％的漂粉溶液中消毒10分鐘左右，取出后用無菌水沖洗4∼5次，即可接種。一般材料的選擇以幼嫩部分為好。草花用嫩莖、花托為好﹔球根花卉用莖頂、鱗莖盤、鱗葉等為好。 （3）接種 接種用的鉗子、解剖刀、接種針等均需在火焰上消毒后用，用后再消毒。將消毒好的材料置于培養皿中，用解剖刀切去其邊緣，再切成小塊接種在培養基上，使組織塊與培養基密合，不得將材料陷于培養基中，接好后隨即將瓶口封好待培養。 （4）培養 接種完畢后即可置于培養室，在恆溫、加光條件下進行培養，培養一段時間后，根據情況將材料從誘導愈傷組織的培養基轉到分化培養基（也有只用一種培養基就可直接誘導分化成綠苗的），最后轉移到生根培養基上。 （5）試管苗移栽 試管苗發根后，必須隨即轉移到栽培基質中去，這種基質可以用培養土、蛭石、珍珠岩等配成。將試管苗從瓶中耿出，洗去殘存的培養基，移植到准備好的基質中去，隨即用細噴壺噴水后加玻璃或塑料罩，3∼4日內不必澆水，以后澆些清水，1周后見苗已挺直，可去罩澆培養液（過去所用培養基的大量及微量元素減半配成），以利生長，2∼4周后可進行常規栽培。 |
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組織培養